Cercetarea asupra bacteriilor necesită o muncă meticuloasă cu numeroase echipamente și instrumente. Pentru ca microorganismele să se înmulțească cât mai repede posibil în condiții de laborator și să poată menține activitatea vitală normală, se folosesc medii nutritive speciale. Compoziția și condițiile biofizice ale acestora sunt potrivite pentru creșterea activă a unei culturi bacteriene.
Media nutritivă. Microbiologie și alte aplicații
Coloiile bacteriene sunt cultivate în laborator pe vase Petri umplute cu conținut asemănător jeleului sau semi-lichid. Acestea sunt medii nutritive, a căror compoziție și proprietăți sunt cât mai apropiate de cele naturale pentru creșterea de în altă calitate a culturilor.
Astfel de medii sunt folosite în cercetarea microbiologică și în laboratoarele de diagnostic medical. Acestea din urmă lucrează cel mai adesea cu frotiuri de bacterii patogene sau oportuniste, a căror poziție sistematică este determinată direct în instituție.
Naturală și sinteticămiercuri
Regula de bază a lucrului cu bacterii este alegerea corectă a mediului nutritiv. Trebuie să îndeplinească numeroase criterii, inclusiv conținutul de micro și macro elemente, enzime, o valoare constantă a acidității, presiunea osmotică și chiar procentul de oxigen din aer.
Mesiile nutritive sunt clasificate în două grupuri mari:
- Medii naturale. Astfel de amestecuri sunt preparate din ingrediente naturale. Aceasta poate fi apa de râu, părți de plante, gunoi de grajd, legume, țesuturi vegetale și animale, drojdie etc. Astfel de medii se caracterizează printr-un conținut ridicat de substanțe chimice naturale, a căror varietate favorizează creșterea culturii bacteriene. În ciuda acestor avantaje evidente, mediile naturale nu permit cercetări specializate cu tulpini bacteriene specifice.
- Suport media sintetic. Ele diferă prin faptul că compoziția lor chimică este cunoscută în rapoarte exacte ale tuturor constituenților. Astfel de medii sunt pregătite pentru o cultură specifică de bacterii, al cărei metabolism este cunoscut în prealabil cercetătorului. De fapt, din acest motiv, este posibil să se pregătească un astfel de mediu sintetic pentru dezvoltarea microorganismelor. Sunt folosite pentru a analiza activitatea vitală a bacteriilor. De exemplu, puteți afla ce substanțe eliberează în mediu și cât de mult. Microorganismele vor crește și în medii naturale, dar este imposibil de urmărit orice modificări cantitative ale compoziției din cauza necunoașterii proporțiilor inițiale ale substanțelor.
Diferenţial-medii de diagnosticare
În lucrul cu bacterii, nu numai mediile nutritive obișnuite pot fi folosite. Microbiologia este o știință vastă și, prin urmare, atunci când se efectuează un studiu, uneori este necesar să se facă o selecție de microorganisme dintr-un anumit motiv. Utilizarea mediilor de diagnostic diferențial în laborator face posibilă selectarea coloniilor bacteriene dorite pe o placă Petri în funcție de semnul biochimic al activității lor vitale.
Compoziția unor astfel de medii include întotdeauna următoarele componente:
1. Nutrienți pentru creșterea celulelor.
2. Substanță analizată.
3. Un indicator care va da o culoare caracteristică atunci când are loc o anumită reacție.
Un exemplu este mediul nutritiv de diagnostic diferenţial „Endo”. Este folosit pentru a selecta colonii de bacterii care pot descompune lactoza. Inițial, acest mediu are o culoare roz. Dacă o colonie de microorganisme nu este capabilă să descompună lactoza, aceasta capătă culoarea albă obișnuită. Dacă bacteriile pot descompune acest substrat, se transformă într-o culoare roșu aprins caracteristic.
miercuri opționale
Laboratoarele de diagnostic funcționează adesea cu tampoane care conțin multe tipuri diferite de bacterii. Evident, pentru munca de calitate, este necesar să selectăm cumva coloniile de care avem nevoie din zeci de străini. Aici poate ajuta un mediu de creștere bacteriană, care este formulat în mod ideal pentru a susține un singur tip de microorganism.
De exemplu,un astfel de mediu electiv este potrivit doar pentru reproducerea Escherichia coli. Apoi, de la însămânțarea multor bacterii pe un vas Petri, vom vedea doar colonii din aceeași Escherichia coli și nu mai mult. Înainte de a începe munca, este necesar să cunoașteți bine metabolismul bacteriei studiate pentru a o selecta cu succes dintr-un amestec de alte specii.
Mediuri de cultură solide, semisolide și lichide
Bacterii pot fi cultivate nu numai pe substraturi solide. Mediile nutritive diferă unele de altele prin starea lor de agregare, care depinde de compoziția în timpul fabricării. Inițial, toate au o consistență lichidă, iar când se adaugă gelatină sau agar într-un anumit procent, amestecul se solidifică.
Mediile de cultură lichide se găsesc de obicei în eprubete. Dacă devine necesară creșterea bacteriilor în astfel de condiții, adăugați o soluție cu o probă de cultură și așteptați 2-3 zile. Rezultatul poate varia: se formează un precipitat, apare o peliculă, fulgi mici plutesc sau se formează o soluție tulbure.
Mediul de cultură dens este adesea folosit în cercetarea microbiologică pentru a studia proprietățile coloniilor bacteriene. Astfel de medii sunt întotdeauna transparente sau translucide, astfel încât să fie posibilă determinarea corectă a culorii și formei culturii de microorganisme.
Pregătire media
Substratele precum amestecurile de carne-peptonă pe bază de bulion, gelatină sau agar sunt foarte ușor de preparat. Dacă trebuie să transformați un substrat solid sau semi-lichid, într-un lichidadăugați 2-3% sau 0, 2-0, 3% gelatină sau agar, respectiv. Ele joacă un rol major în întărirea amestecului, dar nu sunt o sursă de nutrienți. Astfel, se obțin medii nutritive care sunt potrivite pentru creșterea unei culturi bacteriene.
