Termenul „microscopie” are rădăcini grecești. În traducere, înseamnă studiul obiectelor folosind instrumente de în altă precizie. Recent, fluorescența și microscopia electronică au devenit din ce în ce mai populare.
Rezoluție
Sub acesta, de regulă, înțeleg distanța minimă la care pot fi localizate obiectele clar distinse. Gradul de pătrundere în lumea microscopică, capacitatea de a lua în considerare dimensiunea elementului studiat va depinde de rezoluția echipamentului. La o mărire mare, limitele obiectelor se pot îmbina. În consecință, există anumite limite dincolo de care aproximarea elementelor este lipsită de sens.
Metoda de microscopie cu luminiscență: mecanism
Când energia absorbită de o substanță este transformată în radiație vizibilă, apare o strălucire. Se numește luminescență. Acest fenomen se datorează faptului că unele substanțe, sub influența luminii, încep să emită raze cu o lungime de undă diferită (de obicei mare). În plus, unele obiecte care, la iluminare normală, au un anumitculoare, sub influența ultravioletelor își schimbă culoarea.
Specificații
Un obiect care nu poate fi văzut sub lumina ultravioletă poate emite un luciu strălucitor dacă este tratat cu o substanță specială. În ea, elementele strălucesc în culori diferite în întuneric. Puterea radiației este diferită, dar, de regulă, este mică. În acest sens, microscopia cu fluorescență este eficientă într-o cameră întunecată. Când se folosește acest tip de studiu, obiectul este privit în lumina pe care o emite însuși. Compoziția chimică a țesuturilor, celulelor va afecta calitatea studiului. Microscopia cu fluorescență este considerată a fi un studiu histochimic într-o anumită măsură.
Clasificare
Microscopia cu fluorescență poate fi primară sau secundară. În acest din urmă caz, obiectul este prelucrat cu compuși speciali care dau o strălucire. Microscopia fluorescentă primară se bazează pe capacitatea propriei elemente de a emite lumină.
Echipament
Microscopia cu fluorescență se realizează folosind o varietate de dispozitive. Elementul lor principal este iluminatorul. Este echipat cu lampa UV. În plus, dispozitivele folosesc un set de filtre. În unele dispozitive, există destul de multe configurații diferite. În funcție de culoarea folosită pentru a excita luminescența - ultraviolet sau albastru, un filtru adecvat este plasat între sursa de lumină și obiectul studiat. Deoarece strălucirea unui element microscopic este energetic mai slabă decât lumina excitantă, aceasta va fi captată doar într-o singură condiție. Razele în exces de la sursă trebuie tăiate de un filtru galben-verde. Este situat pe ocularul dispozitivului. Cel mai pronunțat efect al luminiscenței va fi atunci când filtrul oprește complet razele emanate de la sursa de lumină.
În ce constă o instalație de lumină vizibilă? Conține o sursă de lumină puternică și un microscop biologic. Un filtru albastru-violet este plasat între oglinda dispozitivului și lampă. Poate fi FS-1, UFS-3 și așa mai departe. Filtrul galben este pus pe ocularul microscopului. Cu ajutorul lor, lumina albastru-violet cade asupra obiectului. Ea excită luminescența. Dar această lumină poate interfera cu vederea strălucirii. Prin urmare, pe drumul către ochi, este tăiat de un filtru galben. Iluminatul este setat conform metodei Koehler, cu o singură excepție. Diafragma condensatorului trebuie să fie complet deschisă. La examinare, este important să folosiți un ulei de imersie nefluorescent. Pentru a-și reduce propria strălucire, i se adaugă nitrobenzen (2-10 picături / 1 g).
Microscopia cu luminescență: aplicații în microbiologie
Beneficiile acestui tip de studiu sunt:
- Capacitate de imagine color.
- Elemente cu autoemisie cu contrast ridicat pe fundal negru.
- Detecția și localizarea anumitor tipuri de viruși și microbi.
- Abilitatea de a studia transparent și opacorganisme vii.
- Studiu al proceselor vieții în dinamica lor.
De asemenea, trebuie spus că microscopia luminiscentă contribuie la dezvoltarea celor mai bune metode de histo- și citochimie, diagnosticare expresă.
