Medicina modernă are metode de diagnostic specifice care fac posibilă stabilirea etiologiei bolilor la om pe baza definirii agentului patogen, substanțe străine genetic care stimulează răspunsul imun, acizi nucleici, precum și modificări alergice și imune care apar din cauza acțiunilor sale. Astăzi, RIA este utilizat pe scară largă în imunologie și virologie, adică radioimunotest, obiectivele stabilirii, componentele, cursul, a căror contabilitate, vom lua în considerare în acest articol. Acest test este capabil să detecteze antigenele ca urmare a interacțiunii lor cu anticorpii.
Definiție
RIA este o metodă de diagnosticare a substanțelor biologic active din lichide, care se bazează pe reacția antigenelor cu anticorpii atunci când se utilizează substanțe analoge marcate cu radionuclizi care au sisteme speciale de legare. După interacţiunea lorse formează un complex imun, care se separă și se studiază radioactivitatea acestuia. Se știe că radioimunotestul se efectuează folosind truse de reactivi standard.
Fiecare reactiv este capabil să determine concentrația unei anumite substanțe. Lichidul biologic prelevat de la o persoană este amestecat cu un reactiv, după perioada de incubație, substanțele radioactive libere și legate sunt separate, apoi se efectuează radiometria și se calculează rezultatele. Un izotop de iod este folosit pentru a eticheta substanțele. Este marcat și adăugat într-o anumită cantitate.
Aplicație
Analiza radioimună are o largă aplicație în medicină și microbiologie. Este folosit pentru a diagnostica bolile cardiace și vasculare, boli ale sistemului endocrin și ale altor sisteme ale corpului. RIA sunt adesea folosite pentru a identifica cauza infertilității, patologia dezvoltării fetale. În oncologie, această analiză este efectuată pentru a determina markerii neoplasmelor pentru a putea monitoriza eficacitatea tratamentului. În imunologie, RIA este folosită pentru a studia prezența imunoglobulinelor, enzimelor, proteinelor și așa mai departe în sânge. Astăzi, această analiză vă permite să detectați concentrația diferiților hormoni până la o milioneme dintr-un gram. Astfel, analiza sângelui radioimună este utilizată pe scară largă în cardiologie, oncologie, endocrinologie, ginecologie și virologie.
Metode RIA
Se obișnuiește să se facă distincția între mai multe metode de analiză, în funcție de naturăreacții:
- Metoda necompetitivă este caracterizată prin astfel de componente de reacție precum antigene standard și detectabile, soluție tampon, anticorpi marcați cu izotopi, anumiți anticorpi care se leagă de sorbent. Un antigen este adăugat la anticorpii care urmează să fie testați. După incubare, apar complexe antigen-anticorp, sorbentul este spălat, se adaugă anticorpi marcați, care se leagă de antigenul din complex. Radioactivitatea depinde de concentrația antigenului testat.
- Radioimunotestul competitiv este determinat de competiția antigenică. Aici există componente ale reacției precum antigenele de control și determinate, o soluție tampon, anumiți anticorpi care se leagă de sorbent, precum și un antigen marcat cu izotop. Diagnosticul începe cu introducerea antigenului care este examinat. Pe sorbent se formează un complex antigen-anticorp. Apoi sorbentul este spălat și antigenul marcat este injectat. Făcând acest lucru, se leagă de anticorp. Cu ajutorul contoarelor se măsoară reacția și cantitatea de radioactivitate. Acesta va fi invers proporțional cu cantitatea de antigen din probă.
- Metoda indirectă este cea mai comună. În acest caz, radioimunotestul componentei de reacție are de exemplu ser de control și test, antigeni sau anticorpi care sunt legați de sorbent, anticorpi marcați cu izotopi, soluții tampon. Anticorpii sau antigenii care sunt diagnosticați reacționează cu antigenii sau anticorpii care sunt legați de sorbent. Apoi incubatul este îndepărtat, sunt injectați anticorpi marcați, care se leagă decomplexe antigen-anticorp.
Metodologie de analiză
Deci, radioimunotestul se efectuează folosind reactivi speciali. Seturile sunt standard, deci nu sunt permise erori sau încălcări. Rezultatele diagnosticului sunt de încredere. Analiza se efectuează dimineața, pentru aceasta iau sânge venos de la o persoană. În laborator, serul este separat de sânge, care va fi folosit pentru RIA. Acest ser este amestecat cu reactivi. Amestecul rezultat este incubat la o anumită temperatură într-un termostat.
Izotopii liberi și legați sunt separați în amestecul rezultat. După aceea, materialul primit este examinat și rezultatele sunt calculate. Mecanismul radioimunotestului are mai multe opțiuni. Tehnica descrisă mai sus este o RIA în fază lichidă, deoarece toate componentele sunt în stare lichidă. Există RIA și fază solidă, unde anticorpii sunt plasați într-un purtător care nu se dizolvă în lichid.
Disponibilitatea diagnosticelor
Utilizarea acestei metode de diagnostic în medicină devine din ce în ce mai populară în fiecare an. Recent, radioimunotestul a devenit o metodă standard de diagnosticare care poate fi prescrisă de un medic atunci când se pune un diagnostic final. Multă vreme acest tip de analiză s-a efectuat doar în laboratoare, astăzi a devenit o metodă de cercetare obișnuită. Dar RIA necesită utilizarea unor echipamente scumpe (contoare gamma), iar kiturile de reactivi au o durată de viață scurtă. Toate acestea sunt principalul dezavantaj al unei astfel de analize, care o determinăcost scump.
În plus, RIA a început recent să înlocuiască metodele de cercetare mai moderne care nu necesită interacțiune cu izotopii. Acestea includ imunotestul enzimatic. Astfel, RIA este de dorit în multe clinici. A fost folosită de multă vreme în orașele mari și centrele de diagnostic, dar în spitalele obișnuite din orașele mici această analiză practic nu este utilizată din cauza costului ridicat.
Demnitatea RIA
Testul radioimuno are multe avantaje. Este destul de specific și are o sensibilitate ridicată, ceea ce face posibilă determinarea prezenței substanțelor biologic active în cantități incredibil de mici. Această analiză se efectuează foarte simplu, o persoană trebuie doar să doneze sânge venos. Rezultatele testelor sunt 100% precise și gata chiar a doua zi. RIA poate fi, de asemenea, ușor automatizat. Astfel, această analiză vă permite să identificați proteinele care sunt produse reziduale ale bacteriilor infecțioase, ceea ce indică prezența infecției în organism.
Diagnostic în virologie
Cea mai promițătoare RIA este pentru virologie, deoarece vă permite să identificați rapid agenții patogeni virali. Acest lucru se datorează faptului că în ultimii ani a crescut incidența diferitelor infecții, care se răspândesc cu viteză mare, provocând mortalitate în rândul oamenilor. Acest lucru este valabil mai ales pentru țările care nu au un nivel ridicatdezvoltarea socială și economică (țările din Orientul Îndepărtat), radioimunotestul este pur și simplu indispensabil aici. Microbiologia folosește și această metodă de diagnosticare pentru a detecta bolile infecțioase cauzate de bacterii patogene. De exemplu, RIA este utilizat pe scară largă pentru a detecta febra tifoidă. În primele zile ale bolii, înainte de numirea tratamentului, este necesar să se efectueze un studiu al fecalelor și vărsăturilor. Cu toate acestea, rezultatele diagnosticului vor fi obținute după mult timp. Aici RIA vine în ajutor, analiza vă permite să identificați agentul cauzal al bolii într-un timp scurt. O persoană donează sânge, a doua zi rezultatele studiului sunt gata. Această analiză ajută la stabilirea unui diagnostic precis.
Rezultate
Testul radioimuno este în prezent una dintre cele mai sensibile metode de diagnosticare. Este folosit pentru a analiza orice substanță împotriva căreia se pot obține anticorpi. Această metodă face posibilă realizarea multor probe în cel mai mic volum al lichidului investigat, precum și înregistrarea rezultatelor în cel mai scurt timp posibil, deoarece poate fi complet automatizat. Această analiză a fost elaborată în anii 1950 de Solomon Burson. Treizeci de ani mai târziu, s-a răspândit. Până în prezent, nu există o alternativă sută la sută la RIA, deoarece analiza are o sensibilitate ridicată. RIA este utilizat în diferite ramuri ale medicinei, precum și în microbiologie și virologie.
În sfârșit
Utilizarea metodei în virologie este foarte relevantă astăzi, așa cum dăcapacitatea de a investiga răspândirea infecțiilor, de a face un diagnostic precis și de a prescrie un tratament specific. Această problemă este relevantă în special pentru țările care au un nivel scăzut de dezvoltare economică și socială. De asemenea, această analiză vă permite să detectați cantitatea de hormoni și enzime din corpul uman. Pentru a obține rezultate fiabile, cercetătorul trebuie doar să doneze sânge pentru analiză. Medicina nu stă pe loc, alături de radioimunotestul, apar noi metode de cercetare, dar RIA continuă să fie unul dintre liderii în diagnosticul medical.
