Bulionul selenit este un mediu de îmbogățire cu proprietăți selective, conceput pentru a izola bacteriile patogene din genul Salmonella (lat. Salmonella). Este foarte eficient dacă este necesar să se detecteze acest agent patogen printre alți reprezentanți ai microflorei intestinale. Mediul este utilizat atât pentru diagnosticare clinică, cât și în scopuri sanitare în testarea alimentelor.
Caracteristici generale
Culionul selenit se prepară pe bază de pulbere, care este un amestec omogenizat de diferite componente ale compoziției. Culoarea materialului uscat poate fi galben deschis sau crem, în funcție de tipul de mediu. Pulberea are proprietăți de curgere liberă.
Bulionul selenit gata este un mediu lichid transparent de culoare galben deschis. Această masă este turnată în recipiente unde se efectuează însămânțarea pentru incubare ulterioară.
Există trei tipuri principale de bulion selenit:
- mediu pur - potrivit pentru izolarea Salmonella din materialul clinic și sanitar;
- cu adaos de manitol (bulion cu două componente) - conceput pentru a funcționa numai cu material clinic;
- Mediu cisteină-selenit - poate fi utilizat pentru a izola Salmonella din biomaterialul patologic al pacientului (fecale, urină etc.).
Aceste tipuri sunt ușor diferite în ceea ce privește compoziția și funcțiile de acțiune.
Sarcina principală a bulionului selenit este de a promova acumularea de salmonella, inhibând creșterea microflorei însoțitoare. Acest lucru face posibilă nu numai detectarea agentului patogen din material, ci și transferul ulterior în agar. Mediul a fost dezvoltat de Leifler, care a descoperit primul efectul selectiv al selenitului împotriva Salmonella.
Compoziție
bulionul selenit conține:
- hidrolizat de cazeină;
- lactoză;
- fosfat de sodiu;
- hidroselenit de sodiu.
Mediul selenit-cisteină, pe lângă aceste componente, conține L-cisteină și fosfat acid de sodiu. Compoziția bulionului de manitol diferă prin aceea că, în loc de hidrolizat de cazeină, include digestia peptică a țesutului animal. Nu există lactoză într-un astfel de mediu, dar există manitol. Acesta din urmă acționează ca un substrat fermentabil și oferă proprietățile de tamponare ale bulionului.
Toate componentele pulberii, cu excepția hidroselenitului de sodiu, sunt numite condiționat parte A, iar substanța selectivă este numită parte B.
Principiul de funcționare și proprietățile mediului
Bulionul selenit funcționează ca mediu de depozitarecu acţiune selectivă. Efectul selectiv este asigurat datorită toxicității selenitului, care inhibă creșterea majorității microorganismelor. În același timp, bacteriile din genul Salmonella sunt capabile să restabilească acest compus, eliminând astfel efectul toxic asupra propriilor celule. Cu toate acestea, în urma reacției, se formează un alcali, care reduce efectul dăunător al selenitului asupra creșterii microflorei asociate și, prin urmare, devine necesară stabilizarea pH-ului. Această funcție este îndeplinită de bacteriile care fermentează lactoza cu formarea de acid. Tamponarea mediului este asigurată de fosfat.
În bulionul cu două componente, pH-ul este stabilizat de manitol. Mediul de cisteină îmbunătățește efectul selectiv împotriva Salmonella. Un astfel de bulion este eficient pentru controlul fondului infecțios la pacienții cu un stadiu neacut al bolii sau la cei convalescenți.
Manifestarea caracteristicilor de creștere ale tulpinilor de referință în mediu poate fi observată după 12-24 de ore de la începutul incubației. În acest caz, Salmonella formează colonii incolore.
Funcții de gătit
Pregătirea mediului se realizează în două etape. În primul rând, se face o soluție cu o componentă selectivă în proporție de 4 grame de selenit de sodiu per litru de apă distilată. Apoi adăugați 19 grame de pulbere principală (partea A). Soluția este bine amestecată și încălzită până când particulele sunt complet dizolvate, după care este turnată în eprubete sterile.
Când gătiți, este important să urmațiregim de temperatură, deoarece mediul este instabil la supraîncălzire. Sterilizarea bulionului poate fi efectuată numai într-o baie de apă sau se poate folosi un jet de abur. Autoclavarea mediului este strict interzisă.
