Metoda de imersie a observației microscopice presupune introducerea unui lichid special între lentila dispozitivului și obiectul studiat. Îmbunătățește luminozitatea și extinde domeniul de mărire a imaginii. Astfel, obiectul poate fi mărit semnificativ și cele mai mici elemente ale sale pot fi examinate fără a schimba echipamentul. În consecință, lichidul se numește imersie. Poate servi ca o varietate de compoziții. Cel mai popular este uleiul de imersie. Luați în considerare caracteristicile sale mai detaliat.
Informații generale
Primul ulei de imersie pentru microscopie a fost cedru. Cu toate acestea, avea un dezavantaj semnificativ. În timp, proprietățile sale s-au schimbat și nu a permis obținerea rezultatelor dorite. În aer liber, lichidul a început să se condenseze treptat (până la întărire). În consecință, s-a schimbat și indicele de refracție. În secolul al XX-lea, a început să fie produs ulei sintetic de imersie. Acest fluid nu a avut deficiența de mai sus.
Standarde pentru uleiuri de imersie
Cheieparametrii fluidului sunt stabiliți în GOST 13739-78. Conform standardului, uleiul de imersie are:
- indice de refracție nd=1,515±0,001;
- transmisie în intervalul spectral de la 500 la 700 nm cu o grosime a stratului de 1 mm - 95%, de la 400 la 480 nm - 92%;
Temperatura optimă la care poate fi folosit uleiul de imersie este de 20 de grade. Există și standarde internaționale. Conform ISO 8036/1, indicele de refracție este de 1,518 + 0,0005, iar transmitanța la stratul de 10 mm pentru intervalul spectral de la 500 la 760 nm este de 95%, iar la 400 nm este de 60%.
Parametrii indicați corespund uleiului de imersie nefluorescent. Standardul ISO 8036-1/2 definește caracteristicile lichidului pentru luminiscență. Transmitanța în intervalul spectral de la 500 la 700 nm într-un strat de 10 mm este de 95%, de la 365 la 400 nm - 60%.
Dificultăți ale discrepanțelor parametrilor
Diferența identificabilă între standardele de mai sus poate duce la deteriorarea performanței unei anumite lentile atunci când se utilizează un fluid neadecvat. Rezultat:
- Contrastul este redus din cauza aberației sferice.
- Câmpul de pe obiectul de cercetare este colorat.
- Iluminarea în planul obiectului studiat și în zona de formare a imaginii acestuia devine neuniformă.
- Imaginea devine neclară.
Nuances
Microscoapele optice au o limită superioară de rezoluțiede puțin mai mult de 100 de ori. La acest nivel de mărire, iluminarea obiectului studiat ar trebui să fie de în altă calitate. În caz contrar, imaginea rezultată va fi atât de întunecată încât va fi imposibil să vedeți obiectul. Faptul este că refracția și împrăștierea luminii au loc între capacul de sticlă și obiectiv. Uleiul de imersie contribuie la o mai mare captare a acestuia. Ca rezultat, imaginea devine mai clară.
Caracteristici ale refracției luminii
Cum obțineți o imagine clară? În diferite medii, refracția luminii are loc în moduri diferite. De exemplu, unghiurile de refracție ale razelor în aer și sticlă sunt diferite. În primul caz, indicatorul este 1,0, în al doilea - 1,5. Aceasta este principala problemă.
Folosirea uleiului vă permite să reduceți indicele de refracție al razelor care trec prin obiectul studiat. Cert este că lichidul are același parametru ca și paharul. Ca urmare, între diapozitiv și lentilă se formează un mediu omogen, iar cea mai mare parte a luminii care trece prin obiect intră în instrument. Rezultă o imagine clară.
Puncte tehnice
De regulă, butoaiele lentilelor de imersie sunt gravate cu ulei. Elementul în sine este utilizat atunci când este necesară o deschidere de 1,0 sau mai mult. Astfel de lentile de „imersie” sunt folosite pentru imersarea directă într-un lichid. În acest sens, acestea sunt complet sigilate. Acest lucru oferă o protecție ridicată împotriva deteriorării lentilelor cauzate de ulei.
Clasificare
Uleiurile sunt folosite în practicădouă vâscozități: în altă (tip B) și scăzută (A). Adesea pe ambalaj puteți găsi informații despre indicele de refracție. De exemplu, produc ulei de imersie (100 ml), al cărui indice de refracție este de 1,515. În spațiul aerului se aplică lichide cu vâscozitate scăzută, iar cu vâscozitate mare - împreună cu condensatoare.
Termeni de utilizare
Pentru a obține o imagine clară a obiectului studiat, trebuie să urmați recomandări destul de simple:
- Găsiți obiectul în studiu pe glisorul din centrul câmpului cu o creștere mică. Pentru aceasta, se folosește un obiectiv cu mărire redusă.
- Întoarce turela.
- Introduceți lentila de 100x în poziția de lucru.
- Puneți o picătură de ulei pe sticlă, a doua pe lentilă.
- Reglați distanța de lucru cu focalizare fină până când subiectul este clar vizibil.
Trebuie să aveți grijă când lucrați. Este important să împiedicați pătrunderea aerului între lamela și obiectiv.
Ulei de imersie „Minimizat”
Lichid este folosit atunci când se lucrează cu lentile acromatice și apocromatice de orice tip de dispozitive, cu excepția celor luminiscente. Potrivit experților care au folosit acest ulei de imersie, acesta are mai multe proprietăți utile. Lichidul îmbunătățește semnificativ vizibilitatea obiectului, minimizând strălucirea, pierderea de lumină și aberațiile optice. Utilizarea uleiului extinde semnificativ gama de capabilități ale echipamentelor.
Curăţareechipament
După lucrul cu ulei de imersie, este necesar să puneți în ordine dispozitivul. Curățarea trebuie făcută înainte ca lentila să se usuce. Hârtia curată pentru lentile este folosită pentru a îndepărta reziduurile de ulei. Pentru a curăța toate suprafețele de sticlă se folosește o foaie rulată. Hârtia pentru lentile trebuie umezită cu o soluție pentru lentile și orice ulei rămas trebuie îndepărtat.
Context istoric
Primul om de știință care a explicat mecanismul imersiei a fost Robert Hooke. În 1678, a fost publicată cartea sa Microscopium, în care erau date toate explicațiile. În 1812, imersia a fost propusă ca mijloc de corectare a aberațiilor lentilelor. Autorul ideii a fost David Buster. Pe la 1840 au fost realizate primele lentile de imersiune. Creatorul lor a fost D. B. Amici. Inițial, cercetătorii au folosit uleiuri de anason ca lichid de imersie. Indicele de refracție era apropiat de cel al sticlei.
