Acest articol va fi dedicat fenomenului reacției de precipitare. Aici vom lua în considerare trăsăturile formulării acestui fenomen, fenomenul de difuzie, caracteristicile generale, rolul în viața umană și multe altele.
Introducere în fenomen
Precipitația este un fenomen de tip serologic, în timpul căruia antigenele solubile interacționează cu anticorpii și, ca urmare, se observă precipitare - un precipitat.
Caracteristica generală a reacției de precipitare este o formă de influența coordonată a antigenului și a anticorpului. Aceste tipuri de interacțiuni fac posibilă determinarea prezenței antigenelor necunoscute în substanța de testat prin adăugarea de anticorpi și antigeni cunoscuți. Procesul de precipitare fără prezența sărurilor va continua mai rău, iar cel mai bun optim se află în intervalul 7,0-7,4 pH.
Constituenții unei reacții
Există trei elemente principale printre componentele reacției de precipitare:
- Un antigen având natură moleculară. Este în starea de tip fin, cu alte cuvinte, acestasolubil. De asemenea, un astfel de antigen se numește precipitogen, care este un lizat sau extract de țesut etc. Un precipitogen are o diferență caracteristică față de un aglutinogen, care constă în dimensiunea particulelor din care constă. Aglutinogenul are o dimensiune celulară inerentă, iar precipitații sunt proporționali cu dimensiunea moleculei. Soluția de antigen este caracterizată prin transparență.
- Un anticorp găsit în serul de sânge uman, precum și în serul de diagnostic imun, care conține anticorpii studiați.
- Electroliții sunt soluții de clorură de sodiu izotonice.
Producere de precipitatogen
Inființarea unei reacții de precipitare este imposibilă fără un precipitatogen, care se obține prin măcinarea materialelor și extragerea antigenelor proteice din acestea. Extracția are loc prin fierbere sau prin alte metode.
Lizatele, precum și extractele de țesuturi și organe, serul de sânge, diverse tipuri de filtrate pe bază de culturi microbiene în bulion, precum și extractul de sare al microorganismelor și substanțele autolizate, sunt un lucru izbitor. exemplu de precipitatogeni.
Se instalează în precipitații
Acum să luăm în considerare metoda de stabilire a reacției de precipitare.
Se efectuează o reacție de precipitare inel, care are loc în eprubete special pregătite. Serul se introduce în cavitatea vaselor, turnându-l peste perete cu ajutorul unei pipete. Apoi, cantitatea adecvată de precipitator este stratificată cu grijă deasupra, iar apoi tubul este adus într-o poziție verticală de la una orizontală. Stabilirea și luarea în considerare a reacției de precipitare este o operațiune foarte meticuloasă. Rezultatul este înregistrat după apariția unui inel alb la granița dintre antigen și anticorp. Dacă elementele de reacție ale reacției corespund între ele, atunci ele se leagă, dar acest lucru devine vizibil după o perioadă lungă de timp de interacțiune a lor.
Reacția de precipitare se realizează și într-o cutie Petri sau pe un pahar. diapozitiv, unde se transferă gelul de agar, aplicând-o într-un strat mic. După ce se întărește în gel, se decupează un număr mic de godeuri în care vor fi plasați antigeni și anticorpi. Există două modalități de a efectua această acțiune: metoda imunodifuziei radiale și imunodifuziei duble.
Informații generale
Mecanica muncii de precipitare este similară cu dispozitivul de aglutinare. Sub influența serului de tip imun, antigenul, care a intrat deja în reacție, își reduce gradul de dispersie. O condiție importantă este transparența atât a serului, cât și a antigenului.
Puteți îmbunătăți înregistrarea reacției dacă suprapuneți antigene pe anticorpi. Ca urmare, se poate observa apariția precipitatelor sub formă de inel. Acest fenomen se numește precipitare inelară și se realizează în tuburi speciale cu un diametru de 2,5 până la 3,5 mm. Unul dintre cele mai comune exemple de reacție de precipitare este diagnosticul de antrax.
Precipitația face posibilă determinarea nivelului de toxicitate al unei culturi de difterie în agar.
În timpul reacției luate în considerareare loc precipitarea complexelor antigenice şi a anticorpilor. Precipitația este un fenomen imunologic care vă permite să determinați cantitatea de anticorpi din serul sanguin al unei persoane bolnave sau vaccinate și al animalelor.
Consecința titrarii
Este important de știut că datele obținute prin titrarea metodei de mai sus nu sunt cuantificabile. Pentru a crea și analiza o evaluare cantitativă a numărului de anticorpi conținut, a fost dezvoltată o tehnică specială de reacție de către M. Heidelberger și E. Kabat, care se bazează pe căutarea și identificarea zonei de echivalență. Amestecarea numărului de vârstă al antigenelor cu un volum constant de antiser duce la o creștere a precipitatului format inițial, iar apoi scade din nou datorită creșterii capacității de a dizolva complexele antigene. Prin determinarea cantității de anticorpi din supernatanții conținute în fiecare tub, puteți constata că unui anumit număr de vase cu anticorpi vor lipsi lichid. Aici, în comparație cu alte eprubete, se va forma cel mai mare precipitat. Datorită acestui fapt și scăderii precipitatului proteic antigenic din valoarea totală a proteinelor, se poate obține valoarea exactă a anticorpilor conținuti în volumul serului specific studiat. În plus, cantitatea de molecule proteice din precipitat este determinată de cantitatea de azot sau folosind metode colorimetrice.
Evaluarea valorilor
Estimarea valorilor precipitațiilor în metodologia de diagnostic ar trebui să țină cont de posibilitatea prezenței în serul imun a unui anticorp care nu are proprietatea precipitinei, din care rezultă că precipitatul în sine nu poate fi formată după reacția cu antigenele. Lista acestor molecule include anticorpi incompleti și unele specii din grupul globulinelor gamma-A.
Reacția de precipitare în condiții de laborator își găsește aplicarea în diferite tipuri de modificări. De exemplu, reacția de termoprecipitare este utilizată pentru a detecta antigenele bacteriene de botulism, antrax etc., care nu suferă denaturare termică. Spre deosebire de precipitarea inelară, acest tip de reacție utilizează filtrate ale materialului în cauză în stare de fierbere.
Analiza reacției de precipitare într-un amestec complex nu permite să se caracterizeze proprietățile elementelor individuale ale amestecului. În astfel de cazuri, o persoană recurge la metoda de precipitare în agar și utilizează, de asemenea, imunoelectrofereză.
Precipitații difuze
În acest domeniu de cercetare, există conceptul de reacție de precipitare difuză (RPD). Se bazează pe capacitatea de a difuza în gel de anticorpi și antigene solubile. Difuzia este capacitatea unei molecule dintr-o anumită substanță de a pătrunde în moleculele alteia, care este cauzată de mișcarea termică.
Gelul este un sistem de tip dispers în care faza lichidă este distribuită uniform în faza solidă. Cel mai adesea, gelul de agar este folosit pentru o astfel de reacție.
După indicarea parametrilor, încondiţiile în care moleculele pot difuza unele faţă de altele, întâlnirea lor va fi însoţită de formarea unui complex antigen + anticorp. Un astfel de neoplasm este capabil să difuzeze, aflându-se în gelul propriu-zis, și va precipita, luând forma unei benzi care poate fi detectată cu ochiul liber. Dacă antigenul și anticorpul sunt omoloage, nu se va forma nicio bandă.
Crearea condițiilor în care va avea loc difuzia în stratul de agar presupune turnarea componentelor, dar numărul total de godeuri și poziția relativă a acestora este determinat de tipul de sarcină care este necesară decide. RPD oferă unei persoane capacitatea de a detecta și identifica viruși izolati necunoscuți prin testare folosind seruri de anticorpi cunoscute.
Aplicație
Precipitațiile sunt utilizate pe scară largă nu numai în diagnosticul bolilor, ci își găsesc aplicarea și în examinarea medico-legală. Este greu de imaginat o analiză în care să fie posibilă determinarea speciei de sânge, a unei părți a unui organ sau a țesuturilor găsite pe o armă criminală care nu folosește reacția de precipitare. In timpul acestui proces se folosesc seruri precipitante care se obtin prin imunizarea diferitelor animale si pasari. Este important ca nivelul titrului seric să nu fie mai mic de 1:10000 și, de asemenea, trebuie să aibă suficientă specificitate. Din punctul detectat de sânge sau crusta acestuia, se face un extract pentru fizic. soluție, la care va fi expusă în continuareser precipitant. Conform acestei reacții, este posibil să se stabilească tipurile de proteine de țesut și organ atât ale oamenilor, cât și ale animalelor. Obținerea extractelor tulburi obligă să recurgă la precipitarea pe agar.
Concluzii
Analizând informațiile citite, putem concluziona că reacțiile de precipitare sunt extrem de importante pentru o persoană, deoarece permit diagnosticarea diferitelor antigene cu ajutorul anticorpilor, acest fenomen fiind utilizat pe scară largă și în examinarea medico-legală și vă permite să identificați tipul de sânge, țesut sau organ în raport cu un anumit subiect. Există mai multe tipuri și metode de precipitare, care sunt utilizate în conformitate cu nevoile emergente ale problemei care se rezolvă.
